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RNA提取試劑盒是如何進(jìn)行提取的呢？

RNA提取試劑盒用于從細(xì)胞、組織、新鮮血液和病毒中提取200bp及以下的smallRNA，用LB10裂解樣品后，加入氯仿，溶液分為無色水相和粉紅色有機(jī)相，RNA在水相中；用RNA硅膠膜離心柱特異地吸附水相中的大分子量RNA(28SrRNA,18SrRNA,mRNA），流出液中的smallRNA用miRNA硅膠膜離心柱特異地吸附。與其它miRNA提取方法相比，該試劑盒裂解能力強(qiáng)、提取量高、專一性強(qiáng)，應(yīng)用范圍廣。RNA提取試劑盒的提取步驟：1、將處理后的樣品在室溫靜置5~10分鐘...

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CST抗體制備的原理和方法

CST抗體的制備工藝：根據(jù)CST抗體制備的原理和方法，主要分為單克隆抗體、多克隆抗體和基因工程抗體三大類。早期傳統(tǒng)的抗體制備方法是將抗原經(jīng)各種途徑免疫動(dòng)物，由于抗原物質(zhì)具有多種抗原決定簇，故可刺激產(chǎn)生多種抗各種決定簇的抗體,形成細(xì)胞克隆，合成和分泌抗體到血清或體液中，故在其血清中實(shí)際上是含多種抗體的混合物，這種用體內(nèi)免疫法所獲得的免疫血清為多克隆抗體(polclonalantibody,Pab)，也是第一代抗體。由于這種抗體是不均一的，無論是對(duì)抗體分子結(jié)構(gòu)與功能的研究或是臨床...

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細(xì)胞轉(zhuǎn)染的幾種方法

細(xì)胞轉(zhuǎn)染是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉(zhuǎn)染目前已成為實(shí)驗(yàn)室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因?qū)爰?xì)胞的范例；化學(xué)介導(dǎo)方法很多，如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù)；生物介導(dǎo)方法，有較為原始的轉(zhuǎn)染，和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。細(xì)胞轉(zhuǎn)染的幾種方法：1.脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法陽離子脂質(zhì)體表面帶正電荷，能與核酸的磷酸根通過...

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美國avivasystemsbiology抗體常用的抗體純化方法及其相關(guān)原理

美國avivasystemsbiology抗體是指機(jī)體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護(hù)作用的蛋白質(zhì)。它（免疫球蛋白不僅僅只是抗體）是一種由漿細(xì)胞（效應(yīng)B細(xì)胞）分泌，被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì)，僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中，及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面?？贵w能識(shí)別特定外來物的一個(gè)*特征，該外來目標(biāo)被稱為抗原。我們知道，一般免疫血清中含有特異性抗體和非特異性抗體，血清蛋白以及其他各種雜蛋白等，在制備特異性抗體過程中當(dāng)抗體的效價(jià)達(dá)到實(shí)驗(yàn)預(yù)期之后，...

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PCR/qPCR耗材選擇——顏色篇

PCR管/板有多種顏色，如透明色、白色、黃色、藍(lán)色、紅色……普通的PCR過程中，管/板的顏色并不會(huì)影響PCR的結(jié)果，但是在qPCR中，管/板的顏色對(duì)于結(jié)果是有很大的影響的。應(yīng)用于qPCR的耗材，一般是白色或者磨砂的塑料耗材。qPCR在DNA擴(kuò)增反應(yīng)中，以熒光化學(xué)物質(zhì)測每次PCR循環(huán)后產(chǎn)物總量，因此與透明塑料管/板相比，白色或磨砂的管/板在應(yīng)對(duì)熒光時(shí)表現(xiàn)更為靈敏，并且結(jié)果更加準(zhǔn)確。這是因?yàn)榘咨暮牟目梢宰柚篃晒庹凵涑龉?，達(dá)到熒光折射的最小化，將更多的熒光信號(hào)反射回檢測器，從而增...

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